MDA-PCR檢測痕量結核分枝桿菌核酸方法的建立

【摘要】：目的建立基于多重置換擴增及PCR (MDA-PCR)技術檢測痕量結核分枝桿菌(M.tb)核酸的方法。方法制備含有M.tb插入序列IS6110和IS1081的不同稀釋濃度的質粒DNA標準品。MDA-PCR分別通過檢測質粒DNA標準品和其他細菌標準株基因組DNA來驗證該方法的敏感度及特異性。另外,通過對模擬結核性腦膜炎(TBM)患者腦脊液(CSF)標本檢測,評價該方法檢測臨床標本的可行性。結果 MDA-PCR方法對質粒DNA標準品IS6110、IS1081基因的最低檢測下限分別為10、25拷貝,其檢測敏感度是ST-PCR方法的40～100倍。另外,該方法對5種其他細菌標準株基因組DNA的檢測結果均為陰性,無非特異性反應發生。MDA-PCR對模擬TBM患者CSF中M.tb IS6110及IS1081基因的最低檢測下限均為1 CFU,其檢測敏感度是ST-PCR的10~4～10~5倍。結論 MDA-PCR方法可提高對CSF中痕量M.tb核酸的檢測效率,為TBM早期診斷提供了一種新的研究策略。

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2	王俊云,王愛英;核酸營養與人體衰老[J];中國老年學雜志;2002年04期
3	趙鑫,張旸,李蓉;核酸及其對衰老的影響[J];中華老年醫學雜志;2000年01期
4	楊文秀,秦春樹;核酸缺乏與疾病[J];沈陽醫學院學報;2000年01期
5	;核酸[J];國外科技資料目錄.醫藥衛生;2000年08期
6	景文之;;神奇的核酸[J];人人健康;1999年09期
7	付愛玲,李前,張興梅,孫曼霽;膜穿透肽介導的核酸轉運[J];生命的化學;2003年05期
8	張永祿;;核酸的化學及生物化學[J];中學化學教學參考;1978年04期
9	李棣生;;核酸與生命[J];化工之友;2001年01期
10	魏菱菲，崔秀云，林琳;核酸制品對小鼠生長的影響[J];大連醫科大學學報;1995年02期
11	鹿倫山;;結核分枝桿菌感染的診斷與防治措施[J];世界最新醫學信息文摘;2016年47期
12	劉忠華;萬康林;陳創夫;;結核分枝桿菌主要分泌蛋白的研究進展[J];中國人獸共患病學報;2007年07期
13	王祥義;核酸營養與肝臟[J];中國廠礦醫學;2002年02期
14	張吉平;張小剛;何秀云;王仲元;金玉蓮;王慶;董亞俊;;結核分枝桿菌利福平耐藥基因突變的研究[J];中國預防醫學雜志;2006年05期
15	黎友倫;羅永艾;鐘敏;陳保文;沈小兵;蘇城;王國治;;依賴利福平結核分枝桿菌的動物實驗研究[J];中華結核和呼吸雜志;2006年09期
16	王寶林,王洪海;結核分枝桿菌DNA疫苗研究進展[J];中華結核和呼吸雜志;2004年11期
17	張舒林,高三友,張進忠,王國斌;外周血單個核細胞中結核分枝桿菌DNA的檢測[J];中華微生物學和免疫學雜志;1999年06期
18	羅振華;王和;;結核分枝桿菌穩定L型感染檢測方法的研究[J];熱帶醫學雜志;2009年01期

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1	王曉珍;謝建平;;世界上最成功的幸存者——結核分枝桿菌[A];重慶微生物學會第九屆會員代表大會暨學術年會論文摘要集[C];2009年
2	吳雪瓊;;人類與結核分枝桿菌[A];中國防癆協會80周年紀念暨2013年全國學術大會論文集[C];2013年
3	康健;王麗梅;柏銀蘭;徐志凱;;結核分枝桿菌持續感染豚鼠模型的建立[A];中華醫學會2014全國微生物學與免疫學學術年會論文匯編[C];2014年
4	楊華;張麗婷;李連青;楊煥森;劉忠華;崔振玲;王潔;陸俊梅;胡忠義;;結核分枝桿菌結合肽的篩選研究[A];首屆中國臨床微生物學大會（寧波會議）暨《醫學參考報》微生物學與免疫學論壇論文匯編[C];2010年
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9	郝萍;李爽;辛毅;馬郁芳;;結核分枝桿菌磷酸葡糖胺變位酶的研究[A];東北三省生物化學與分子生物學學會2008年學術交流會論文摘要[C];2008年
10	朱麗;朱明利;;結核分枝桿菌細菌型與L型耐藥機制及茜草素作用的研究進展[A];2011年浙江省醫學會醫學病毒學分會、醫學微生物與免疫學分會學術年會論文匯編[C];2011年
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中國碩士學位論文全文數據庫

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3	胡鵬;核酸適體在蛋白質和小分子檢測中的新方法研究[D];湖南大學;2010年
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9	趙佳麗;CRISPR/Cas12a系統在非核酸分析物檢測中的應用研究[D];湖南大學;2021年
10	周菲;丙型肝炎病毒非結構蛋白NS2的核酸適體對病毒生活周期的影響[D];湖南大學;2012年
11	劉麗坤;結核分枝桿菌Rv3813c的克隆、表達和功能鑒定[D];大連醫科大學;2005年
12	張素素;基于核酸循環電路和CRISPR/Cas12a靈敏檢測新方法研究[D];聊城大學;2021年
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15	鄭斐;結核分枝桿菌轉錄因子WhiB2蛋白的功能和轉錄調控研究[D];西南大學;2012年
16	蘇銳;結核分枝桿菌phoS2基因在大腸桿菌中的高效表達及其產物的抗原性分析[D];第四軍醫大學;2009年
17	張晨輝;結核分枝桿菌mce1操縱子上Rv0177蛋白與巨噬細胞互作機制的研究[D];西南大學;2017年
18	周麗蓉;結核分枝桿菌特異性抗原的制備及其抗原性的初步研究[D];重慶醫科大學;2004年
19	于召簫;結核分枝桿菌ABC轉運蛋白Rv1473的功能研究[D];西南大學;2017年
20	任賽;結核分枝桿菌蛋白PPE25在脅迫應答和免疫中的功能研究[D];西南大學;2017年

中國重要報紙全文數據庫

前2條

1	;生命從核酸開始生命因核酸改變[N];中國中醫藥報;2005年
2	記者胡德榮;一種化合物能抑制結核分枝桿菌生長[N];健康報;2012年

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